转基因骨髓间质干细胞在组织工程承载体中生长及成骨转化的研究Study on the growth status and osteogenic potential of gene transferred mesenchymal stem cells with Ad-BMP-2 planted on tissue engineering scaffold
吉光荣;姚猛;陈立民;孙崇毅;王立春;
摘要(Abstract):
[目的]观察经携带人骨形态发生蛋白-2(BMP-2)基因的复制缺陷重组腺病毒(Ad-BMP-2)转染的兔骨髓间质干细胞(MSCs)在以兔脱细胞脱钙骨基质作为组织工程承载体中的生长情况及转基因前后细胞成骨能力的变化。[方法]用携带有人BMP-2基因片段的复制缺陷重组腺病毒(Ad-BMP-2)转染兔骨髓间质干细胞并将其种植在兔脱细胞脱钙骨基质支架中,扫描电镜观察转基因细胞在支架中的黏附生长情况;并通过检测培养上清中的碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP)含量及Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)的分泌量来评估转基因对MSCs成骨能力的影响。[结果]转基因骨髓间质干细胞在组织工程支架中黏附生长良好,转基因组细胞的ALP、BGP含量及Ⅰ型胶原的分泌量与对照组比较差异有显著性意义。[结论]转基因骨髓间质干细胞在兔脱细胞脱钙骨基质支架中能很好的黏附并立体生长,转基因细胞在目的基因所表达的BMP-2蛋白作用下成骨能力明显增强。
关键词(KeyWords): 骨形态发生蛋白;骨髓间质干细胞;转基因;组织工程
基金项目(Foundation): 黑龙江省青年科学技术专项基金资助(NO.QC06C050)
作者(Author): 吉光荣;姚猛;陈立民;孙崇毅;王立春;
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DOI:
参考文献(References):
- [1]Williams JM,Adewurmi A,Schek RM,et al.Bone tissue engineering using polycaprolactone scaffolds fabricated via selective laser sintening[J].Biomaterials,2005,26(2):4817-4827.
- [2]Jansen EJ,Sladek RE,Bahar H,et al.Hydrophobicity asadesign crite-rion for polymer scaffolds in bone tissue engineering[J].J Biomateri-als,2005,26(21):4423-4431.
- [3]刘建宇,林欣,裴建华,等.人骨形成蛋白-2重组腺病毒表达载体的构建[J].中国地方病学杂志,2001,20:167-168.
- [4]吉光荣,林欣,韩剑峰,等.转基因骨髓间充质干细胞复合纤维蛋白凝胶修复兔桡骨缺损[J].中华创伤杂志,2003,19:728-730.
- [5]吉光荣,林欣,韩剑锋,等.腺病毒介导人BMP-2对骨髓间质干细胞成骨能力的影响[J].中华显微外科杂志,2004,27:46-47.
- [6]Service RF.Tissue engineers build new bone[J].Science,2000,289:1498-1450.
- [7]Kawabata K,Sakurai F,KoizumiN,et al.Adenovirus vector-mediated gene transfer into stem cells[J].Mol Pharm,2006,3:95-103.
- [8]Volk SW,Diefenderfer DL,Christopher SA,et al.Effects of osteogenic inducers on cultures of canine mesenchymal stem cells[J].Am J Vet Res,2005,66:1729-1737.
- [9]杨志明,余希杰,解慧琪,等.不同来源成骨细胞生物学特性的比较研究[J].中华创伤杂志,2001,17:10-13.
- [10]陈克明,葛宝丰,刘兴炎,等.纤维蛋白用作骨组织工程载体并修复骨缺损[J].中国矫形外科杂志,2005,13:1241-1243.
- [11]李文革,徐莘香.细胞黏附与骨发生[J].中国骨伤,2004,17(5):316-318.