中国矫形外科杂志

2020, v.28;No.485(03) 252-259

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miR-140对早期骨关节炎软骨细胞衰老的调控作用及机制
Regulatory effect and mechanism of miR-140 on chondrocyte senescence in early-stage osteoarthritis

李兰;梁明玮;陆燕蓉;斯海波;沈彬;

摘要(Abstract):

[目的]探索miR-140对早期骨关节炎(OA)软骨细胞衰老的调控作用及机制。[方法]收集人膝关节正常、早期OA(E-OA)和中晚期OA(ML-OA)软骨组织,酶消化法获得相应组别软骨细胞。首先,PCR检测各组miR-140水平,流式细胞仪分析细胞周期,衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-βGal)试剂盒分析SA-βGal活性,PCR和免疫细胞化学法检测衰老分子p16~(INK4a)、p21和p53的表达。然后,取E-OA软骨细胞设空白、IL-1β、miR-Scr和miR-140 mimic组并给予相应干预,检测并比较各组miR-140水平。最后,取E-OA软骨细胞设空白、IL-1β、miR-Scr+IL-1β和miR-140 mimic+IL-1β组并给予相应干预,分析和比较各组细胞周期、SA-βGal活性及衰老分子表达情况。[结果]正常、E-OA和ML-OA三组间miR-140水平、G0/G1期细胞比例(G0/G1%)、SA-βGal活性及衰老分子水平比较差异均有统计学意义(P<0.05),miR-140水平与OA分级呈显著负相关(P<0.05),而G0/G1%、SA-βGal活性及衰老分子阳性率与OA分级呈显著正相关(P<0.05)。在E-OA软骨细胞中,与空白组相比,IL-1β组miR-140水平显著降低(P<0.05),miR-Scr组无明显改变(P>0.05),miR-140 mimic组显著升高(P<0.05)。在E-OA软骨细胞中,IL-1β组G0/G1%、SA-βGal活性及衰老分子表达均显著高于空白组(P<0.05)、与miR-Scr+IL-1β组相比差异无统计学意义(P> 0.05),miR-140+IL-1β组G0/G1%、SA-βGal活性及衰老分子表达均显著低于miR-Scr+IL-1β组(P<0.05)。[结论]软骨细胞衰老与OA发生发展密切相关,上调miR-140表达可有效抑制E-OA软骨细胞衰老,是延缓E-OA进展的潜在治疗策略。

关键词(KeyWords): 早期骨关节炎;microRNA-140;软骨细胞;衰老

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金项目(编号:81802210、81672219);; 四川省科技厅重点项目(编号:2018SZ0223、2018SZ0250)

作者(Author): 李兰;梁明玮;陆燕蓉;斯海波;沈彬;

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