中国矫形外科杂志

2013, v.21;No.327(13) 1340-1345

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脱细胞软骨基质来源的多孔支架复合山羊髓核细胞体内初步构建组织工程髓核的实验研究
Construction of tissue engineering nucleus pulposus in vivo by combining acellular cartilage matrix derived porous scaffolds with goat nucleus pulposus cells

伍耀宏;徐宝山;杨强;李秀兰;张杨;夏群;许海委;

摘要(Abstract):

[目的]探讨脱细胞软骨基质多孔支架复合PKH26标记的山羊髓核细胞体内异位构建组织工程髓核的可行性。[方法]制备脱细胞软骨基质来源的多孔支架,扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)观察、天狼星红染色、HE染色观察、MTT毒性检测;分离山羊髓核细胞,通过倒置显微镜观察、番红O染色、Ⅱ型胶原免疫组化染色进行鉴定;将PKH26标记的山羊髓核细胞接种支架上,体外培养3 d后进行LIVE/DEAD活性染色,将细胞支架复合物置入裸鼠皮下,培养6周,病理切片,荧光显微镜下观察,进行番红O、Ⅰ、Ⅱ型胶原免疫组化染色。[结果]扫描电镜观察支架孔隙相连通且分布均匀,天狼星红染色支架呈黄绿相间色,HE支架淡染,MTT检测细胞增殖曲线无统计学差异(P>0.05);P1代髓核细胞呈软骨样细胞形态,番红O染色、Ⅱ型胶原免疫组化染色均阳性,PKH26标记后的细胞呈红色荧光;体外LIVE/DEAD染色细胞呈绿色荧光,体内培养6周后,带红色荧光的细胞填满支架孔隙,番红O、Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性,Ⅰ型胶原免疫组化染色弱阳性。[结论]以脱细胞软骨基质多孔支架复合山羊髓核细胞在体内能够形成组织工程髓核样组织。

关键词(KeyWords): 脱细胞软骨基质;PKH26;组织工程;髓核

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金课题资助项目(编号:81272046,31000432);; 中国博士后科学基金资助项目(编号:2011M500530,2012T50235);; 天津市卫生局科技基金重点项目(编号:2010KR08)

作者(Author): 伍耀宏;徐宝山;杨强;李秀兰;张杨;夏群;许海委;

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