于明东;李书忠;

• 1:青岛大学医学院附属医院脊柱外科

摘要(Abstract)：

[目的]研究RFC(还原叶酸载体)、GST-π(谷胱甘肽S转移酶π)、DHFR(二氢叶酸还原酶)mRNA在人骨肉瘤U2-OS细胞系及人骨肉瘤耐药细胞系U2-OS/R1-R3中的表达差异,并探讨其在人骨肉瘤MTX化疗耐药中的意义。[方法]采用冲击并逐步增加诱导药物浓度诱导的方法,诱导人骨肉瘤细胞系U2-OS,并建立耐MTX细胞系(U2-OS/R1-R3),利用荧光定量PCR技术在mRNA水平检测RFC、GST-π、DHFR在U2-OS及(U2-OS/R1-R3)中的表达。[结果]本试验成功建立三株人骨肉瘤耐药细胞系U2-OS/R1-R3中,荧光定量PCR结果显示MTX耐药与DHFRmRNA表达增加有关,与RFCmRNA的表达降低有关,与GST-πmRNA的表达增加有关。[结论]本试验在基因水平探讨人骨肉瘤细胞MTX化疗耐药机制,DHFR、GST-π基因表达的增加及RFC基因表达的降低参与了人骨肉瘤细胞的MTX耐药,为临床探索骨肉瘤患者的MTX耐药机制提供了重要的依据,为临床筛选MTX化疗不敏感患者提供重要的依据。

关键词(KeyWords)： 实时荧光定量PCR;甲氨喋呤(MTX)还原叶酸载体(RFC);二氢叶酸还原酶(DHFR);谷胱甘肽S转移酶(GST-π)

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作者(Author): 于明东;李书忠;

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参考文献(References)：

• [1]郭全义,卢世璧,张莉等.骨肉瘤的治疗及生存率的多因素分析[J].中国矫形外科杂志,2006,7:497-499.
• [2]邓高荣,李书忠.还原性叶酸载体与骨肉瘤甲氨蝶呤化疗[J].国外医学:骨科学分册,2005,3:150-152.
• [3]Moscow JA.Methotrexate transport and resistance[J].Leuk Lympho-ma,1998,3:215-224.
• [4]Serra M.Analysis of dihydrofolate reductase and reduced folate carrier genestatus in relation to methotrexate resistance in osteosarcoma cells[J].Annals of Oncology,2004,15:151-160.
• [5]Scionti I,Michelacci F.Clinical impact of the methotrexate resistance-associated genes C-MYC and dihydrofolate reductase(DHFR)in high-grade osteosarcoma[J].Ann Oncol,2008,8:1500-1508.
• [6]Yoshiro N.Serum glutathione-s-transferaseπas a tumor marker for gastrointestinal maligancies[J].Cancer,1989,63:317.
• [7]Sauerbreg A,Volm M,Zintl E,et al.Expression and clinical signifi-cance of resistance proteins in initial acute lymphatic leukemia(All)in childhood[J].Klin Padiatr,1995,207:230.
• [8]魏玲,宋现让,等.MDRI和GST-π在骨软组织肉瘤中的表达及其与化疗耐药的关系[J].中华肿瘤杂志,2006,6:445-448.
• [9]Ginzinger DG.Gene quantification using real-time quantitative PCR:an emerging technology hits the mainstream[J].Exp Hematol,2002,30:503-512.