中国矫形外科杂志

2014, v.22;No.354(16) 1498-1503

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Toll样受体亚型在干细胞成骨过程中的作用
Effect of Toll-like receptor on the ossification capacity of bone marrow mesenchymal stem cells

王晓光;陈奇;徐晓峰;张志坚;胡浪;

摘要(Abstract):

[目的]探索大鼠骨髓间充质干细胞(Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,BMSCs)成骨过程各阶段,不同Toll样受体(Toll Like Receptor,TLR)亚型的作用。[方法]利用贴壁培养法分离纯化SD大鼠BMSCs,传代扩增,免疫荧光分析检测细胞表面分子CD44、CD105、Vimentin的表达并进行细胞鉴定。选取活力好的第3代细胞,随机分为3组:空白组,TLR-3激活组和TLR-4激活组,均以成骨诱导培养液在相同的环境下培养。Westernblot法检测Collagen-I和Osteocalcin的表达,观察干细胞向成骨细胞(Osteoblast,OB)分化。于培养10、14 d进行碱性磷酸酶染色及茜素红染色,观察矿化结果。[结果]细胞表面抗原CD44、CD105、Vimentin呈阳性。Collagen-I和Osteocalcin的蛋白表达依次为,TLR-4激活组>TLR-3激活组>空白组。3组碱性磷酸酶染色及茜素红染色均呈阳性,TLR-3激活组强度最高,TLR-4激活组和空白组差异不明显。[结论]在BMSC成骨过程中,不同TLR亚型在不同的阶段起作用,TLR-3和TLR-4均可在BMSCs向OB分化过程中起促进作用,TLR-4的效果更明显。在OB成熟矿化为骨细胞的过程中,TLR-3起促进作用,而TLR-4则起抑制作用。

关键词(KeyWords): Toll样受体;骨髓间充质干细胞;成骨分化;矿化

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 镇江市科技发展基金项目(编号:SH2002019)

作者(Author): 王晓光;陈奇;徐晓峰;张志坚;胡浪;

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