中国矫形外科杂志

2006, (11) 845-848

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重组人BMP-7真核表达质粒的构建及转染软骨细胞后的表达
Construction of eucaryotic expression plasmid carrying the recombined human BMP-7 gene and its expression in chondrocytes

卢华定;蔡道章;马会慧;卢建溪;

摘要(Abstract):

[目的]构建重组人骨形成蛋白-7(rhBMP-7)基因真核表达质粒,转染兔关节软骨细胞,探讨外源性人rhBMP-7基因在转染软骨细胞中的表达情况及对细胞生物学性状的影响。[方法]采用PCR技术扩增rhBMP-7基因,将其插入真核表达载体pcDNA 3.1中,体外分离培养兔关节软骨细胞,然后用构建的rhBMP-7质粒转染软骨细胞,经G418筛选、免疫组化染色和逆转录PCR检测其表达,同时检测表达产物对维持软骨细胞表型的作用。[结果]经过PCR及酶切鉴定证实获得了BMP-7真核表达质粒pcDNA 3.1-rhBMP-7,通过免疫组化染色和逆转录PCR鉴定证实rhBMP-7在转染后的软骨细胞中得到了表达,其表达产物促进软骨细胞表型的维持。[结论]外源性rhBMP-7基因转染软骨细胞可以获得高效表达,并具有一定的维持软骨细胞表型的作用,为软骨组织工程的研究提供了改良的种子细胞。

关键词(KeyWords): 骨形成蛋白-7;基因转染;软骨细胞

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 广东省科技计划项目(No.2003A30201027);; 广东省医学科研基金(NO.B2002040)

作者(Author): 卢华定;蔡道章;马会慧;卢建溪;

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