中国矫形外科杂志

2013, v.21;No.325(11) 1127-1132

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软骨细胞外基质对脐带Wharton胶间充质干细胞生物学性状的作用
Effects of the cartilage extracellular matrix on the biological characteristics of Wharton' s jelly-derived mesenchymal stem cells in the umbilical cord

赵鹏;刘舒云;卢世璧;杨建华;袁玫;张莉;黄靖香;赵斌;眭翔;许文静;郭全义;

摘要(Abstract):

[目的]探讨软骨细胞外基质微环境对源于人脐带Wharton胶的间充质干细胞增殖的影响,观察该微环境促进干细胞向软骨细胞方向分化的潜能。[方法]①取3%(w/v)猪关节软骨细胞外基质和2.4%(w/v)海藻酸盐为原料,按体积比1∶1的比例充分混合,将其用带16 G针头的1 ml注射器匀速滴入氯化钙溶液制作软骨细胞外基质/海藻酸盐混合凝胶微球,通过扫描电镜观察该微球内部结构。②将人脐带Wharton胶中间质干细胞(WJMSCs)混于软骨细胞外基质/海藻酸混合液,滴入氯化钙溶液形成复合干细胞的混合凝胶微球进行培养,设为实验组;同理WJMSCs混合于单纯藻酸盐凝胶并形成微球作为对照组。③通过扫描电镜和FDA-PI染色观察上述两组微球内细胞的生长粘附情况,体外培养4周,经组织学和DNA测定观察干细胞的表型及增殖情况。[结果]①构建的软骨细胞外基质/海藻酸盐混合凝胶微球呈半透明乳白色,内部具有较多不规则的孔隙结构,具有三维立体培养细胞的环境特点。②比较实验组和对照组不同细胞培养时间段细胞增殖量,发现实验组细胞增殖率高于对照组,第28 d时两组细胞DNA含量的差异有统计学意义,(P﹤0.05)。③实验组中细胞呈圆形或椭圆形,形成明显的软骨陷窝样的结构,有大量细胞外基质分泌,对照组中细胞呈圆形,陷窝样的结构不明显。④组织学染色观察发现:实验组中培养的干细胞明显有向软骨细胞方向分化的趋势。[结论]软骨细胞外基质微环境不仅利于人脐带Wharton胶中间质干细胞的增殖,而且具有将WJMSCs向软骨细胞方向诱导分化的潜能。

关键词(KeyWords): 脐带Wharton胶间充质干细胞;软骨细胞外基质;藻酸盐;软骨组织工程

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金资助项目(编号:30973047,81000810,81071458);; 863计划项目(编号:2102AA020502)

作者(Author): 赵鹏;刘舒云;卢世璧;杨建华;袁玫;张莉;黄靖香;赵斌;眭翔;许文静;郭全义;

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DOI:

参考文献(References):

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