中国矫形外科杂志

2016, v.24;No.393(07) 636-642

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KLF4调控的TLR-2/p38MAPK/NF-κB信号通路在脊柱结核发病机制中的实验研究
Role of Kruppel-like factor 4 regulated TLR-2/p38MAPK/NF-κB signaling pathway in the pathogenesis of spinal tuberculosis

王骞;牛宁奎;王自立;耿广起;施建党;金卫东;

摘要(Abstract):

[目的]探讨KLF4调控的TLR-2/p38MAPK/NF-κB信号通路在脊柱结核发病机制中的作用。[方法]实验组为经手术及病理证实的8例脊柱结核患者,对照组为5例健康人群。收集并对比分析A、B两组的临床表现、血常规、ESR、C-RP。采集外周静脉血10 ml,提取总RNA,利用表达谱基因芯片检测A、B两组外周血白细胞差异表达的mRNA基因,筛选出在脊柱结核患者中高表达的KLF4基因。初步验证采用以下三种方法:应用RT-PCR检测外周血中KLF4、TLR-2、p38、NF-κB基因在mRNA水平的表达;应用ELISA法对IFN-r、TNF-α、IL-1进行检测;应用Western Blot法检测外周血白细胞中KLF4、TLR-2、磷酸化p38(p-p38)、p38、NF-κB蛋白的表达。[结果]临床结果显示,相对于正常对照组,脊柱结核组ESR、CRP、中性粒细胞相对值升高,淋巴细胞绝对值、淋巴细胞相对值及血红蛋白值降低。芯片结果提示脊柱结核患者与正常对照组之间显著差异表达基因共68条,上调基因16条,下调基因52条,其中KLF4基因在脊柱结核患者外周血中差异表达最为显著,升高2.89倍。RT-PCR结果显示脊柱结核患者较正常对照组外周血KLF4、TLR-2、p38、NF-κB基因在mRNA水平均高表达,IFN-γ、TNF-α、IL-1表达亦升高,同时KLF4、TLR-2、p-p38、NF-κB蛋白表达水平增加,但p38蛋白水平无明显变化。[结论]病灶活动期脊柱结核患者外周血KLF4基因表达升高可能通过TLR-2/p38MAPK/NF-κB途径参与脊柱结核炎症反应。

关键词(KeyWords): KLF4;p38MAPK;TLR-2;NF-κB;脊柱结核

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金课题(编号:81260282);; 宁夏自然科学基金课题(编号:NZ11195,NZ11275)

作者(Author): 王骞;牛宁奎;王自立;耿广起;施建党;金卫东;

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DOI:

参考文献(References):

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