中国矫形外科杂志

2013, v.21;No.317(03) 285-290

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来源于长管状骨的组织工程纤维环支架的理化特性及细胞生物学相容性研究
Study of physicochemical characteristics and biocompatibility of a novel tissue engineering annulus fibrosus scaffold derived from long bone

伍耀宏;徐宝山;杨强;李秀兰;张杨;马信龙;夏群;闫中胜;许海委;

摘要(Abstract):

[目的]以来源于长管状骨的骨基质明胶(bone matrix gelatin,BMG)为材料制备纤维环支架,并检测其理化特性及细胞生物相容性。[方法]以猪股骨近端松质骨为材料,制备外径为1 cm、内径为0.5 cm的中空环,经脱钙脱细胞处理后制成纤维环支架。支架行Hoechst 33258、HE、Ⅰ型胶原免疫荧光、天狼星红染色,扫描电镜(scan-ning electron microscope,SEM)观察并计算孔径,同时进行生物力学测定。四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazoly tetrazoli-um,MTT)检测支架不同浓度浸提液的细胞毒性,取P1代山羊纤维环细胞,用注射器将细胞接种至支架上,体外培养48 h,通过活/死细胞染色(LIVE/DEAD cells staining)、扫描电镜(SEM)、HE染色评价支架与细胞的生物相容性。[结果]大体观察支架表面光滑,呈乳白色,扫描电镜支架孔隙分布较均匀且相连通,支架孔径为(401.4±13.1)μm,Hoechst 33258、HE染色均未见细胞残留,Ⅰ型胶原免疫荧光阳性,天狼星红染色支架红染,支架压缩弹性模量为(47.75±6.32)kPa。四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测各组间细胞增殖差异无统计学意义(P﹥0.05),活/死细胞染色示细胞在支架上呈绿色荧光,扫描电镜和HE染色示细胞粘附在支架孔隙表面及周围,有基质分泌。[结论]以来源于长管状骨的骨基质明胶为材料制备的中空环形支架脱细胞彻底,具有合适的孔径结构,在机械性能、组成方面与正常纤维环相接近,具有良好的生物相容性,符合组织工程纤维环支架载体的条件。

关键词(KeyWords): 组织工程;纤维环支架;骨基质明胶;生物相容性

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金资助项目(编号:81272046,31000432);; 中国博士后科学基金资助项目(编号:2011M500530,2012T50235);; 天津市卫生局科技基金资助项目(编号:2012KY24)

作者(Author): 伍耀宏;徐宝山;杨强;李秀兰;张杨;马信龙;夏群;闫中胜;许海委;

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