中国矫形外科杂志

2018, v.26;No.442(08) 734-739

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非接触共培养人髓核细胞诱导血管内皮细胞凋亡及抑制迁移的研究
Apoptosis and migration inhibition of vascular endothelial cells induced by indirect co-culture of human nucleus pulposus cells

王金鹏;罗卓荆;杨柳;

摘要(Abstract):

[目的]利用人髓核细胞系(NPCs)与人微血管内皮细胞系(HMEC-1),通过非接触共培养探讨人髓核细胞对血管内皮细胞的凋亡诱导并抑制迁移的影响。[方法]利用过氧化氢诱导NPC衰老,进行细胞衰老β-半乳糖苷酶染色。将正常NPC、衰老NPC与HMEC等比例(1:1)通过Transwell培养板进行非接触共培养作为实验组,单纯HMEC培养作为对照组,培养24 h光镜下观察内皮细胞的生长情况,用流式细胞仪检测HMEC凋亡率,ELISA检测细胞培养液中TNF-α、VEGF的量。各组利用不同细胞条件诱导培养基和Transwell小室检测其纵向迁移能力。[结果]利用200μmol/L与400μmol/L过氧化氢处理NPC细胞衰老β-半乳糖苷酶染色阳性比例分别达25%和55%。共培养1d后正常NPC组HMEC凋亡率高于衰老NPC组(P<0.05)。对照组细胞凋亡率均低于5%,明显小于实验组(P<0.01)。ELISA检测培养液中TNF-α、VEGF,正常NPC组TNF-α高于衰老NPC组(P<0.05)。VEGF正常NPC组低于衰老NPC组(P<0.05)。趋化实验正常NPC条件培养基迁移膜下细胞数少于衰老NPC组(P<0.05),且少于对照组(P<0.01)。[结论]在非接触共培养条件下人髓核细胞可以诱导血管内皮细胞凋亡,并且抑制内皮细胞迁移,髓核细胞衰老之后诱导凋亡能力下降,抑制迁移能力减弱,进而证明随年龄增长髓核细胞的衰老引起椎间盘微环境变化可能为椎间盘退变中血管长入的诱发因素之一。

关键词(KeyWords): 髓核细胞;血管内皮细胞;凋亡;迁移;共培养;椎间盘退变

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金重点项目资助(编号:81730065)

作者(Author): 王金鹏;罗卓荆;杨柳;

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参考文献(References):

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