中国矫形外科杂志

2012, v.20;No.307(17) 1611-1614

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生长分化因子5促进软骨细胞肥大成熟的实验研究
Experimental study on the effect of GDF-5 on maturation and hypertrophy of chondrocytes

张山锋;勘武生;刘军;肖军;杨钟华;

摘要(Abstract):

[目的]探讨生长分化因子5(GDF-5)在诱导成人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)成软骨分化的同时,促进其肥大成熟的作用。[方法]体外分离培养hBMSCs,取第四代细胞实验。将细胞消化、悬浮,以5×106/ml的细胞密度进行高密度培养,分别用含0、500 ng/ml GDF-5的软骨诱导液(CM)诱导培养3、4周。免疫组化、甲苯胺蓝染色检测II型胶原、X型胶原和蛋白多糖的表达情况。荧光实时定量RT-PCR检测两组微团II型胶原、X型胶原和蛋白多糖mRNA的表达情况。[结果]实验组微团中的细胞体积较对照组稍大,细胞密度稍低。甲苯胺蓝和免疫组化染色结果显示各组微团均有Ⅱ型胶原、X型胶原和蛋白多糖的表达和分泌,且4周实验组的表达最为强烈。荧光实时定量RT-PCR检测示,干预后3周实验组II型胶原、蛋白多糖基因表达量明显高于3周对照组(P<0.05),但X型胶原基因表达与对照组相比无显著性差异(P>0.05);干预后4周实验组X型胶原基因表达高于其余各组(P<0.05),Ⅱ型胶原、蛋白多糖基因表达明显高于两对照组(P<0.05),但与3周实验组相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]GDF-5在诱导细胞成软骨分化的同时,还可促进其成熟肥大。

关键词(KeyWords): 成人骨髓间充质干细胞;生长分化因子5;软骨分化;成熟肥大

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation):

作者(Author): 张山锋;勘武生;刘军;肖军;杨钟华;

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参考文献(References):

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