中国矫形外科杂志

2011, v.19;No.278(12) 1014-1018

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联合转染人VEGF_(165)和ANG-1双基因对大鼠骨髓基质干细胞成骨分化的影响
Effect of adenoviruses-mediated human angiopoietin-1 and VEGF_(165) gene over-expression on ex vivo osteogenic potential of rat bone marrow stromal cells

张金康;孟国林;刘建;胡蕴玉;袁志;段春光;白峰;李丹;白建萍;刘民;

摘要(Abstract):

[目的]研究联合转染入血管内皮细胞生长因子165(VEGF165)和血管紧张素-1(ANG-1)双基因对大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)成骨分化潜能的影响。[方法]将本室构建的编码人VEGF165和ANG-1双基因腺病毒质粒pAd-VIA在QBI-293A细胞内进行包装和扩增,获得腺病毒载体pAd-VIA,将其体外转染大鼠BMSCs,应用诱导培养液定向诱导向成骨细胞分化。实验分为4组:A.腺病毒载体pAd-VIA转染BMSCs并诱导组;B.BMSCs诱导组;C.腺病毒载体pAd-VIA转染BMSCs组;D.单纯BMSCs组。通过碱性磷酸酶(ALP)染色和活性的测定、Ⅰ型胶原免疫荧光染色、茜素红染色来评价联合转染双基因对BMSCs成骨分化潜能的影响。[结果]重组腺病毒质粒pAd-VIA在QBI-293A细胞内成功包装和扩增,有大量的绿色荧光蛋白表达,体外转染大鼠BMSCs后,A、B组的ALP染色、Ⅰ型胶原免疫荧光染色、茜素红染色为阳性,而C组和D组为阴性。ALP活性表达具有时间相关性,3 d开始表达,7 d到达高峰,在7、14 d,A、B组与C、D组之间ALP表达均具有统计学差异(P<0.01),A组和B组之间,在各个时间点均无统计学差异(P>0.05)。[结论]腺病毒载体pAd-VIA转染大鼠BMSCs后,未明显影响其体外成骨分化潜能。

关键词(KeyWords): 血管内皮细胞生长因子;血管生成素-1;骨髓基质干细胞;成骨分化

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金(编号:30672142)

作者(Author): 张金康;孟国林;刘建;胡蕴玉;袁志;段春光;白峰;李丹;白建萍;刘民;

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