中国矫形外科杂志

2015, v.23;No.369(07) 637-643

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慢病毒介导TGF-β1基因诱导大鼠骨髓间充质干细胞成软骨细胞分化
Transforming growth factor-beta1 gene transfected using lentiviral vector induced chondrogenesis of rat bone marrow mesenchymal stem cells

陈祁青;金红婷;应俊;吴承亮;王萍儿;肖鲁伟;童培建;

摘要(Abstract):

[目的]探讨慢病毒介导转化生长因子β1(tansforming growth factor bata 1,TGF-β1)基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)诱导成软骨细胞分化的作用。[方法]密度梯度离心法分离培养BMSCs,探索病毒感染最佳条件,取第3代细胞,分为实验组和对照组,通过慢病毒载体将外源性TGF-β1基因转染入细胞,观察绿色荧光表达情况,Real-time PCR法和western blot法检测TGF-β1基因的mRNA和蛋白表达情况,7、14 d时行Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色、甲苯胺蓝染色和Real-time PCR检测Ⅱ型胶原及聚集蛋白聚糖的表达。[结果]TGF-β1基因转染BMSCs后能够稳定表达。转染7、14 d时,实验组免疫细胞化学染色、甲苯胺蓝染色均为阳性。转染7、14 d时,实验组II型胶原mRNA均显著高于对照组(P<0.01)。转染7 d时,实验组聚集蛋白聚糖mRNA变化不明显,而14 d时显著高于对照组(P<0.01)。[结论]慢病毒介导的TGF-β1基因可成功转染大鼠BMSCs,并诱导其向软骨细胞分化。在此过程中软骨特异性标志Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的mRNA表达具有时间差异性。

关键词(KeyWords): 骨髓间充质干细胞;成软骨分化;转化生长因子β1;慢病毒载体;大鼠

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金资助项目(编号:81373669);; 浙江省重点科技创新团队计划资助项目(编号:2011R50022-01);; 浙江省重点实验室计划资助项目(编号:2013E10024)

作者(Author): 陈祁青;金红婷;应俊;吴承亮;王萍儿;肖鲁伟;童培建;

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参考文献(References):

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