中国矫形外科杂志

2017, v.25;No.412(02) 145-151

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非接触共培养条件下山羊BMSCs向纤维环样细胞诱导分化的研究
Differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells into annulus fibrosus-like cells in an indirect co-culture system: an animal experiment study

孟格栋;吴一民;李树文;白明;杜志才;银和平;

摘要(Abstract):

[目的]建立山羊骨髓源性间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)和纤维环细胞(annulus fibrosus cells,AFCs)非接触共培养体系,探讨BMSCs向纤维环样细胞诱导分化潜能,为组织工程修复纤维环缺损研究提供种子细胞。[方法]复苏第3代AFCs和BMSCs,观察细胞形态并绘制生长曲线。采用Transwell系统共培养AFCs和BMSCs,7 d后,检测BMSCs向纤维环样细胞分化情况。通过甲苯胺蓝染色检测聚集蛋白聚糖的表达,通过免疫细胞化学法检测Ⅰ型胶原蛋白的表达,realtime PCR检测Ⅰ型胶原、聚集蛋白聚糖和Sox-9 mRNA表达。[结果]非接触共培养7 d后,BMSCs形态转变为纤维环细胞样。非接触共培养组中BMSCs的聚集蛋白聚糖与Ⅰ型胶原染色呈阳性,与AFCs对照组结果一致,BMSCs对照组结果呈阴性。与AFCs对照组相比,共培养组中Ⅰ型胶原、聚集蛋白聚糖及Sox-9的mRNA表达量分别为0.86、1.13和0.91(P>0.05),而BMSCs对照组中未检测到其表达。[结论]建立稳定的山羊AFCs和BMSCs非接触共培养体系,共培养7 d后,BMSCs具有AFCs特性,表明共培养条件促进BMSCs诱导分化为纤维环样细胞。

关键词(KeyWords): 骨髓间充质干细胞;纤维环细胞;非接触共培养;组织工程;山羊

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金地区科学基金资助项目(编号:81260287);; 内蒙古医科大学第二附属医院基金科研项目(编号:2015YJJ05);; 内蒙古医科大学青年创新基金项目(编号:YKD2016QNCX044);; 内蒙古自治区自然科学基金项目(编号:2015MS08120)

作者(Author): 孟格栋;吴一民;李树文;白明;杜志才;银和平;

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