中国矫形外科杂志

2002, (10)

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人破骨细胞生成抑制因子编码区基因的克隆及在成肌细胞中的表达
Cloning of Human Osteoclastogenesis Inhibitory factor (Osteoprotegerin)and Its Expression in Mammalian Cell

刘继中,胡蕴玉,纪宗玲,陈苏民,陶惠人

摘要(Abstract):

目的 :克隆人破骨细胞生成抑制因子 (OPG/OCIF)编码区基因并在真核细胞中表达。方法 :以人骨肉瘤细胞系MG63的总RNA为模板 ,采用RT -PCR法得到OPG/OCIF的编码区cDNA ,构建真核表达载体 pIRES2 -OPG -EGFP ,在脂质体介导下转染小鼠成肌细胞系C2C12 ,经G418压力筛选建立稳定转染人OPG/OCIF的细胞系 ,共聚焦荧光显微镜及核酸杂交方法检测OPG/OCIF在细胞中的表达。结果 :获得的人OPG/OCIF编码区全长cDNA序列与文献报道的核苷酸序列一致 ,核酸杂交证实稳定转染人OPG/OCIF编码区cDNA的小鼠成肌细胞系中有OPG/OCIFmRNA的表达。结论 :获得人破骨细胞生成抑制因子编码区全长cDNA并证实在真核细胞中稳定表达。

关键词(KeyWords): 破骨细胞生成抑制因子(骨保护素);基因克隆;基因表达

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基金项目(Foundation):

作者(Author): 刘继中,胡蕴玉,纪宗玲,陈苏民,陶惠人

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