中国矫形外科杂志

2004, (15)

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微载体技术体外扩增人骨髓间充质干细胞
Culturing human mesenchymal stem cells in vitro in large scale on microcarriers

单建林,许建中,周强,王序全,朱灏,赵敏

摘要(Abstract):

目的 :建立一种快速、大量扩增人骨髓间充质干细胞 (hMSCs)的方法 ,以满足组织工程技术治疗大段骨缺损对细胞数量的需要。方法 :普通培养的第 3代人MSCs1× 10 7个及 0 5gCytodex3微载体 ,加入有 10 0ml培养基的搅拌生物反应器中培养 ,在前 6h ,每隔半小时以 40r/min的速度搅拌 2min ,以后连续搅拌。于培养的第 1、 3、 5、7、 9、 11d取样在相差显微镜下动态观察细胞生长情况 ,最后进行细胞表面生长因子的检测。结果 :接种 2 4h后 87%的MSCs细胞贴附于微载体并铺展 ,3d后生长加速 ,约 8~ 9d后细胞生长达最大值。最终细胞收获密度为接种时的约 15~ 2 0倍。流式细胞仪检测显示 ,所培养的MSCs均一的表达CD2 9和CD44 ,而CD3 4、CD45和HLA DR阴性。结论 :应用微载体技术可以大量、快速的培养扩增人骨髓间充质干细胞 ,细胞表面抗原特性不变 ,能够满足组织工程技术治疗大段骨缺损的需要

关键词(KeyWords): 微载体;生物反应器;人间充质干细胞;细胞培养

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家 8 63计划资助项目 (2 0 0 3AA2 0 50 0 2 ) ;; 重庆市科技计划资助项目 (2 0 0 3 - 1 3 - 6) ;; 第三军医大学科研资助项目 (XG2 0 0 32 7)

作者(Author): 单建林,许建中,周强,王序全,朱灏,赵敏

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